高考生物知識點(diǎn)之基因工程及其應(yīng)用

　　1.概念：按照人們的意愿，把一種生物的某種基因提取出來，加以修飾改造，然后放到另一種生物的細(xì)胞里，定向地改造生物的遺傳性狀。

　　2.原理基因重組

　　3.工具：

　　A．基因的"剪刀"：限制性內(nèi)切酶

　�、俜植迹褐饕�在微生物中。

　�、谧饔锰攸c(diǎn)：特異性，即識別特定核苷酸序列，切割特定切點(diǎn)。

　�、劢Y(jié)果：產(chǎn)生黏性未端（堿基互補(bǔ)配對）。

　　B．基因的"針線"：DNA連接酶

　�、龠B接的部位：磷酸二酯鍵，不是氫鍵。

　�、诮Y(jié)果：兩個相同的黏性未端的連接。

　　C．基因的"運(yùn)載工具"：運(yùn)載體

　�、僮饔茫簩⑼庠椿�因送入受體細(xì)胞。

　�、诰邆涞臈l件：a、能在宿主細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定地保存。b、具有多個限制酶切點(diǎn)。

　　c、有某些標(biāo)記基因。

　　③種類：質(zhì)粒、噬菌體和動植物病毒。

　�、苜|(zhì)粒的特點(diǎn)：質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體。

　　4．基因操作的基本步驟：

　　①提取目的基因：人們所需要的特定基因，如人的胰島素基因、抗蟲基因、抗病基因、干擾素基因等

　�、谀康幕�因與運(yùn)載體結(jié)合（以質(zhì)粒為運(yùn)載體）：用同一種限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒DNA（運(yùn)載體），使其產(chǎn)生相同的黏性末端，將切割下的目的基因與切割后的質(zhì)�；旌�，并加入適量的DNA連接酶，使之形成重組DNA分子（重組質(zhì)粒）

　　③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞常用的受體細(xì)胞：大腸桿菌、枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌、動植物細(xì)胞

　�、苣康幕�因檢測與表達(dá)

　　檢測方法如：質(zhì)粒中有抗菌素抗性基因的大腸桿菌細(xì)胞放入到相應(yīng)的抗菌素中，如果正常生長，說明細(xì)胞中含有重組質(zhì)粒。

　　表達(dá)：受體細(xì)胞表現(xiàn)出特定性狀，說明目的基因完成了表達(dá)過程。如：抗蟲棉基因?qū)�入棉�?xì)胞后，棉鈴蟲食用棉的葉片時被殺死；胰島素基因?qū)�入大腸桿菌后能合成出胰島素等。

　　5．轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性

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